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アミロイドβペプチド(Aβ)の病的凝集は、AD患者の進行性認知機能低下の主な原因の一つである。 Aβの凝集を阻害し、神経変性を抑制する化合物の開発が不可欠である。 この目的のためには、Aβオリゴマー形成に対する化合物の直接的効果を示すことができる、迅速で信頼性の高いアッセイが必要である。

SCANTOXは、in vitroでのAβ凝集体の形成に対する開発化合物の有益な効果を直接可視化できる、迅速で再現性の高いスクリーニングアッセイ、Amorfix Aggregated Aβアッセイ(A4)を独占的に提供しています。 Aβ凝集の動態は、チオフラビンT色素(ThT)を用いて経時的にモニターすることもできる。 このアッセイは、凝集したAβペプチドに結合すると蛍光(Ex/Em=440/484 nm)が増加するというThT色素の特性に基づいている。

アベタアグレ-Fig1

図1:A4アッセイによるin vitroでのAβオリゴマーの測定。化合物をin vitroで48時間Aβ1-42と共凝集させた。 凝集したAβはアフィニティー相互作用によってモノマーから分離された。 凝集解除後、免疫吸着アッセイを用いて元々凝集していたAβを検出した。 Aβレベルは、ビヒクル対照(VC)に対する凝集Aβの割合として評価した。 平均値±SEM;一元配置分散分析(One-way ANOVA)とBonferroniのポストホックテスト;***p<0.001。

アベタアグレ-Fig2

図2:ThTアッセイによるin vitroでのAβオリゴマーの測定。化合物をAβ1-42およびThTと共凝集させ、Aβ凝集の動態を緑色蛍光の増加として経時的にモニターした。 データはRFU(相対蛍光単位)で示した。 参考品(A;RI、タンニン酸)および100μM濃度の試験品(B)は、Aβ凝集を減少させることがわかった。 平均値±SEM。