아밀로이드-β 펩타이드(Aβ)의 병리적 응집은 알츠하이머병 환자의 점진적인 인지 기능 저하의 주요 원인 중 하나입니다. Aβ 응집을 방해하여 신경 퇴행을 억제할 수 있는 화합물의 개발은 필수 불가결합니다. 이를 위해서는 Aβ 올리고머 형성에 대한 화합물의 직접적인 효과를 보여줄 수 있는 빠르고 신뢰할 수 있는 분석법이 필요합니다.
Scantox는 빠르고 재현 가능한 스크리닝 분석법인 Amorfix Aggregated Aβ Assay (A4)를 독점적으로 제공하여 개발 화합물이 Aβ 응집체 형성에 미치는 유익한 효과를 체외에서 직접 시각화할 수 있습니다. 또한 티오플라빈 T 염료(ThT)를 사용하여 시간에 따른 Aβ 응집의 동역학을 모니터링할 수도 있습니다. 이 분석은 응집된 Aβ 펩타이드에 결합하면 형광(Ex/Em=440/484nm)이 증가하는 ThT 염료의 특성을 기반으로 합니다.
그림 1: A4 분석법을 통한 시험관 내 Aβ 올리고머 측정. 화합물을 시험관 내에서 48시간 동안 Aβ1-42와 공동 응집시켰습니다. 응집된 Aβ는 친화성 상호작용을 통해 단량체로부터 분리되었습니다. 분리 후, 면역 흡착 분석법을 사용하여 원래 응집된 Aβ를 검출했습니다. Aβ 수준은 차량 대조군(VC)의 응집된 Aβ의 %로 평가했습니다. 평균 ± SEM; Bonferroni 사후 테스트를 사용한 일원 분산 분석; ***p<0.001.
그림 2: ThT 분석에 의한 시험관 내 Aβ 올리고머 측정. 화합물을 Aβ1-42 및 ThT와 공동 응집시키고 녹색 형광의 증가로 시간 경과에 따른 Aβ 응집의 동역학을 모니터링했습니다. 데이터는 RFU(상대 형광 단위)로 표시됩니다. 100µM 농도의 기준 항목(A; RI, 탄닌산)과 시험 항목(B)은 모두 Aβ 응집을 감소시키는 것으로 나타났습니다. 평균 ± SEM.
