Scantoxは、組織サンプルの収集から、すべての実験手順とその結果を記載した研究報告書の提出まで、一連の組織学サービスを提供しています。 当社のアプローチは、お客様の特定のニーズに応じてあらゆるサービス依頼をカスタマイズできる、一連の手順構成要素に基づいています。 ワークフローの入口と出口を自由に選択することができます。
Histology Workflow
特定のニーズに合わせたカスタムメイドのリサーチサービス
SCANTOXの豊富な齧歯類系統をご利用いただくか、または外部からのマウス注文をご依頼ください。 げっ歯類のサンプルの他にも、ヒトや霊長類の組織も標準的に処理しています。 私たちは脳と脊髄の組織採取を専門としていますが、肝臓、腎臓、脾臓肺、筋肉、腸、皮膚、その他、興味のあるあらゆる組織の解剖と分析も同様に可能です。 Scantoxは、組織サンプル1つにつき得られる情報を最大限にするために、同じ動物の一部の生化学的分析も行っています。 切片作成は、切片平面、切片の厚さ、収集スキーム、スライド上の切片の数や向きなどのパラメータを含め、お客様のニーズに応じて完全にカスタマイズすることができます。
サンプルは最新の機器と確立されたプロトコルを用いて処理されます。 さらに、お客様のために常に新しいマーカーや試薬を確立し、文献調査、有望なマーカーの同定と選択、包括的な試験、標識のバリデーションなどのサービスを提供しています。 弊社では常時数百種類の確立された抗体をストックしており、ターゲットの組み合わせはほぼ無制限に可能です。 当社は5チャンネルの蛍光イメージングを提供しており、最大4種類の抗体と細胞核のDAPIカウンターステインで組織を標識することができる。 自動画像取得は高速でコスト効率が高く、高解像度の全スライド画像が得られます。 画像解析はマクロベースで自動化されているため、迅速で偏りのない、評価者に依存しない定量データが得られます。 しかし、画像解析はカスタマイズすることもでき、関心のあるラベリングの詳細に正確に焦点を当てることができます。
要約すると、経験豊富で十分な訓練を受けたスタッフによるお客様の貴重なサンプルの迅速な社内処理を提供し、信頼できる運送会社と協力することで、お客様の生物学的サンプルの安全な処理と移送を保証します。
標的組織の剥離、組織ブロックの正確なトリミング、組織サンプルの固定と包埋のために、高度に標準化された既定の手順が確立されています。 しかし、ご要望に応じて、カスタマイズされたプロトコルを使用したり、確立することも可能です。 ご要望をお聞かせください。 RNase-freeの経験も豊富です。
固定
- 標準:4%パラホルムアルデヒド
- 代替品グルタルアルデヒド、亜鉛、ピクリン酸
埋め込み
- スタンダードOCT
- パラフィン包埋は現地の外部パートナーと協力して行う
- ご希望の方向(冠状、矢状、水平、縦、横)をお選びください。
- ご要望に応じた組織アレイの作製
私たちの専門知識は、幅広い切片作製技術と組織収集戦略をカバーしています。 お客様のプロジェクトの特定の要件に従って、サンプルを処理します。
セクショニング
- クライオトーム(ライカ、CM3050Sおよびサーモ、NX-70)
- 振動刃ミクロトーム(ライカ、VT1000S)
- パラフィン切片は現地の外部パートナーと協力して行う
- 任意の方向を選び、断面の厚さを指定する
- Uniform systematic random sampling available
(説明はhttp://www.stereology.info/sampling/ を参照)。
収集
- コレクション・スキームの指定
- システマティック・ユニフォーム・ランダム・サンプリングあり
(説明はhttp://www.stereology.info/sampling/ を参照) - フリーフローティング・セクション
- 個別または複数のセクションをスライドにマウント
- 組織アレイ
- ニーズに応じてスライドを選ぶ
染色技術と応用
私たちは、数百の確立された抗体のストックを用いて、マルチチャンネル免疫蛍光法(1回の実験で最大4抗体+DAPI染色)を日常的に行っています。 また、常に新しいマーカーを確立しています。 ご要望に応じて、発色免疫化学染色も行います。 お客様のニーズに合わせて、染色プロトコールをカスタマイズし、最適化することも可能です。 病理検査は自社では行っておりませんが、外部パートナーと提携し、自社サービスとワンストップで提供しております。
私たちの専門知識には以下が含まれます:
- 何百もの確立された抗体とプロトコール
- 様々な生物種の様々な組織の処理と分析の専門知識
- 抗体の試験と最適化
- ウイルス感染のターゲット検証
- トランスジェニックモデルにおけるターゲットの検証
- 化合物の検出
一般染色
- ヘマトキシリン・エオシン
- クレシルバイオレット(ニッスル)
- ルクソール・ファストブルー
- その他多数
特殊染色
- チオフラビンSまたはコンゴーレッド(アミロイド斑、タウのもつれ)
- ゴルジ・コックス銀含浸
- プルシアンブルー(微小出血)
- …ご要望に応じて他の染色
多次元画像取得
私たちが提供するもの
- 自動化された包括的な多次元画像取得
- 系統的定量化のためのモザイク(タイル状)高解像度全スライドスキャン
- 最大5チャンネルのエピ蛍光イメージング(緑、赤、赤外、遠赤、核色素DAPI)
適切な画像管理
自家蛍光は軽視されがちだが、深刻な問題である。 ほとんどの組織は、特異的染色と誤解される可能性のある一定レベルの自家蛍光を示す。 非特異的シグナルは通常、年齢や神経細胞サイズとともに増加する。
この現象をコントロールするために、5つある蛍光チャンネルのうち1つを「内在性」蛍光の画像化に充てることが多い。 このチャンネルを “標識 “チャンネルから差し引くことで、標的構造に由来する特異的シグナルを決定することができる。
この例では、ミクログリア(緑矢印)がIba1抗体によって550nmチャンネルで特異的に標識されている。 赤血球(白矢印)または細胞内リポフスチン粒(白矢印)に由来する強いシグナルは、488 nmの非標識チャネルにも現れるため、非特異的自家蛍光として同定される。 神経細胞の体節は650nmのNeuNで標識されている。
自家蛍光チャンネルを用いた画像補正の例: (A)元のIba1画像。 (B)自家蛍光チャンネル。 (C)Iba1以外のバックグラウンドシグナルを除去するためにAからBを差し引いた結果。 補正された画像はIba1シグナルの定量に使用できる。
私たちは、洗練されたマクロベースのソフトウェアソリューションを使用して、脳の形態や病理のさまざまな特徴、例えば、細胞体や軸索線維の数値密度、シナプス密度、樹状突起の配列、脳領域やプラークの面積や体積を自動的に解析します。 私たちは、新しい定量化方法の開発だけでなく、使用されている方法の評価(実現可能性分析)や既存の方法の改善(測定証明)も喜んで行います。
標識構造の同定と検出
- 検出された標識構造の精度:
- 可能な限りノックアウト組織での抗体の検証
- 適切な画像管理
- 研究全体を通して、閾値設定とフィルタリングのパラメーターを決定し、一貫して使用する。
領域とオブジェクトの特徴の分析
私たちは日常的に、自動的に生成されるさまざまな読み出しを提供しています:
- 免疫反応面積
- 免疫反応性粒子の蛍光強度の和または平均値
- 標識粒子の数、サイズ、密度、形状
- オブジェクトのサイズ除外とビニング
- 体積推定のための正確な形態計測による関心領域の定義
- その他多数
統計データ分析
- 科学者と生物統計学者のチームによる、行動テストと身体測定の専門的な統計データ分析(偏りのない代表的なもの
- 測定と結果の入念な品質チェック
実験と結果の報告
- 各試験の最後には、すべての実験手順、結果の質的・量的評価、包括的な統計分析を含む完全な試験報告書が提出される。
- 希望に応じて、調査期間中、常に最新情報を提供
皆さんの素晴らしい仕事に心から感謝します。 プロフェッショナリズムと仕事の計画、実施、評価の質の高さには本当に感心させられました! 皆さんの献身的な努力と本当に素晴らしい仕事に心から感謝します。
ありがとうございました。さらなるプロジェクトが続くことを願っています。 いずれにせよ、貴社のプロフェッショナリズムとデータの品質には大変感銘を受けました!