神経変性疾患におけるミクログリアの重要性はよく知られており、そのためこれらの細胞は新たな薬理学的介入の標的として頻繁に用いられている。

5xFADマウスの単離成体ミクログリア細胞に、pH感受性のpHrodoRed標識と結合したAβ1-42を添加すると、IncuCyte® Livecellイメージングシステムで赤色蛍光の増加として測定可能な取り込みとリソソーム分解をモニターすることができる。

pHrodo™Redで標識したAβ1-42を添加してからすでに8時間後、5xFADミクログリアは年齢をマッチさせた非トランスジェニックミクログリアと比較して2倍以上の蛍光強度を示し、これは5xFADミクログリアにおけるAβの強力な貪食反応を反映している(図1A)。 非トランスジェニックミクログリアもAβ1-42の貪食を示したが、5xFADミクログリアのこの極めて強い貪食反応は時間とともに持続し、最終的には細胞の上清中に残存するAβ1-42を測定することで確認された。 5xFADミクログリアは、上清中のAβ1-42の有意な減少として観察される非遺伝子組み換えミクログリアと比較して、有意に多くのAβ1-42を取り込んだ(図1B)。

貪食

1:5xFADおよび非トランスジェニック(ntg)動物の単離成体ミクログリアにおけるAβ1-42貪食能の評価。 pHrodo™Red標識Aβ1-42およびIncuCyte® Livecellイメージングを用いて、Aβ1-42貪食を48時間測定した。 (A). 48時間培養後、同じ細胞の上清を分析し、残存するAβ1-42を調べた(B)。 (B). n=5/群。 平均値±SEM。 両側無対t検定; ***p<0.001。

あるいは、生後早期の初代ミクログリア、マウスミクログリア細胞株BV2、またはiPSC由来のミクログリアも、化合物処理に反応したAβ1-42取り込みを評価するためのpHrodo™ Red貪食アッセイに使用することができる。

さらに、他の疾患関連ペプチドやタンパク質をpHrodo™Redで 標識することも可能です。

図2-貪食

2 pHrodo™ Red標識Aβ1-42とIncuCyte® Livecellイメージングを用いたBV2細胞におけるAβ1-42貪食の評価。 pHrodo™ Red標識Aβ1-42とインキュベートしたBV2細胞の4時間後のオレンジ蛍光を示す代表的な画像。 スケールバー 200 µM。

したがって、5xFADマウスの成体および生後早期の初代ミクログリア細胞、マウスミクログリア細胞株BV2、iPSC由来のミクログリアは、in vitroでの貪食作用の研究に適している。

In Vitro
サービス

Scantox は、遺伝子改変および非遺伝子改変の細胞株、グリア細胞、初代ニワトリ、ラットの末梢神経系および中枢神経系ニューロン(異なる発生段階)や器官型脳スライスなどを含む、数々の標準化細胞培養システムを使った in vitro 研究サービスを提供しています。 ご要望に応じて、新しい評価系の開発・バリデーションも行います。
もっと詳しく知る

In Vivo
サービス

中枢神経系の創薬における CRO トップリーダーとして、Scantox は遺伝子改変動物を使ったサービスを提供しています。 当社は、遺伝子改変疾患モデルの生成、特性化、維持、およびそれらモデルの薬品試験プロジェクトへの適用において、20 年以上の豊富な経験を有しています。
もっと詳しく知る

Ex Vivo
サービス

Scantox は、神経変性疾患や希少疾病の分野におけるエキスパートです。 当社は、潜在的な治療法の新しいアプローチを試験して評価するための最先端の研究環境を提供しております。
もっと詳しく知る

バイオバンク

Scantox の in vivo 評価系は十分に特性化され有効性が認められているため、中枢神経系の創薬を次のレベルに押し上げる上で有用なツールとなります。 当社の in vivo 評価系に由来する様々な検体を含む当社のバイオバンクのサンプル資料を使い、お客様の研究を喜んでお手伝いさせていただきます。脳細胞、脳脊髄液および血漿サンプルなど、様々な年齢層の遺伝子改変動物および非遺伝子改変動物の細胞をご利用いただけます。
もっと詳しく知る

バイオマーカー

Santox は、遺伝子改変疾患モデルの生成、特性化、維持、およびそれらモデルの薬品試験プロジェクトへの適用において、20 年以上の豊富な経験を有しています。
もっと詳しく知る

組織学サービス

Scantox は、組織サンプルの採取から、実験手順および実験結果すべてを含む研究レポートの納品に至るまで、様々な組織学サービスを提供しております。 当社のアプローチは、お客様特有のニーズに合わせてどのようなサービスもカスタマイズできる、一連の手順構築ブロックに基づいています。 当社のワークフローにおいて、どこでも開始点または終了点として選んでいただくことができます。
もっと詳しく知る

バイオマーカー

Scantox は、様々な疾病の解析に対応する幅広い範囲の分子生物学的解析方法を提供しております。 ユニットは QPS Neuropharmacology で行われる in vitro および in vivo 研究に対応していますが、外部の前臨床試験や臨床試験からの通常のサンプル解析も同じ手法で行われています。in vitro および in vivo の前臨床サンプル、および臨床サンプルにおいて同じ解析方法を用いることにより、研究プロジェクトのトランスレーション的価値が高まります。
もっと詳しく知る