LPSで刺激された器官型海馬スライスは、in vitroで、発達段階の化合物が炎症酵素活性化に及ぼす影響を調べるのに最適のツールである。
生後脳の三次元構造と異なる細胞タイプの相互作用を維持することで、このシステムはin vivoの状況に酷似しており、同時に早期スクリーニングにいくつかの利点を提供する:
- いつでも上清を採取できる
- BBB透過性の問題に直面することなく、新規化合物を試験する。
- 準高スループット
- デキサメタゾンが参照化合物となりうる
以下に示すように、スライス組織内のNLRP3発現と上清中のIL-1β放出などを評価することにより、インフラマソームの活性化をモニターすることができる:
図1:LPS刺激24時間後のマウス海馬スライスにおけるNLRP3の定量。
A: 自動ウェスタンブロットシステム(WES)によるLPS刺激器官型脳スライスのNLRP3定量。B:WESで測定したLPS刺激器官型脳スライスのNLRP3曲線下面積(AUC)値。
整列ドットブロット;平均±SEM;各群n = 3 – 4。
デキサメタゾン(Dexa)を参照化合物とした。
一元配置分散分析(One-way ANOVA)後、Dunnettの多重比較ポストホックテストを行い、LPS処理群と比較した; ***p<0.001.図2:LPS刺激24時間後のマウス海馬スライスによるIL-1ß放出。
整列ドットブロット;平均値±SEM;各群n = 4 – 5。
デキサメタゾン(Dexa)を参照化合物とした。
一元配置分散分析(One-way ANOVA)後、LPS処理群と比較したDunnettの多重比較ポストホック試験; ***p<0.001。インフラムマソーム研究の開始については、今すぐお問い合わせください!