軸索機能の病理学的変化は、多くの神経疾患の特徴としてよく知られている。今日、傷害後の軸索修復を刺激することは、新しい治療薬の開発にとって重要な側面である。マイクロ流体チャンバー（MFC）を用いることで、ソーマから独立した軸索コンパートメントに関するユニークな知見を得ることができる。そこで我々は、野生型成体マウスの解離DRGニューロンを用いて、MFCにおける軸索損傷と再成長のモデルを確立した。MFCの体細胞側にニューロンを播種して3日後には、すでに軸索が微小溝を横切り始めている。培養5日後には、軸索は完全に溝を越え、軸索側に美しいネットワークを構築した（図1 A）。その後、軸索コンパートメントから培地を素早く除去することで、神経細胞を軸索切断することができる（図1 B）。発生化合物は、体細胞と軸索室の間の静水圧差を利用することで、軸索側または体細胞のどちらか一方だけに選択的に適用することができる。ビヒクル処理細胞と比較した軸索側へのNGF適用の効果を定量的に解析したところ、交差軸索の数には影響が見られなかったが、分岐と軸索の長さが有意に増加した（図2）。 
図1. マイクロ流体チャンバー内の野生型成体マウスのDRGニューロンの代表画像。 DRGニューロンをDIV5まで培養し、固定した。
(A)と
(B)機械的軸索切断。
Tubulin III (TubIII)標識で神経細胞とその伸長を可視化し、DAPIで核をカウンターステインした。
軸索切断前の軸索側の交差軸索
(A）と軸索切断による軸索の除去
(B).
スケールバー1,000μm。 
図2. 軸索切断24時間後の軸索再成長に対するNGF処理の効果。 交差軸索の総数を画像で定量化し、以下のマーカーを評価した。
(A）、交差軸索1本あたりの分岐点数
(B）および全軸索の全長
(C）；n＝4ウェル／群。
対応のないt検定； *p<0.05；**p<0.01。
VC：ビヒクルコントロール；NGF：神経成長因子。DRGニューロンの研究を開始するには、今すぐお問い合わせください！
