모든 세포 배양 실험에서 적절한 판독값을 선택하는 것은 매우 중요합니다. Scantox는 테스트 물질의 효과를 특성화하고 정량화하기 위해 다양한 파라미터에 대한 광범위한 분석을 제공합니다.
당사의 확립된 세포 기반 분석법은 세포 생존력, 증식, 세포 사멸, 산화 스트레스, 미토콘드리아 활성 및 세포 신호 경로 등 광범위한 파라미터를 다룹니다. 또한 맞춤형 세포 이미징 및 분석 분석을 사용하여 스크리닝 분석에 완벽한 솔루션을 찾는 과정을 지원할 수 있습니다.
살아있는 세포 분석에는 고급 Sartorius IncuCyte 플랫폼을 활용합니다. 이 시스템은 세포의 행동을 실시간으로 모니터링하고 분석하여 세포 생리, 증식, 이동 등에 대한 동적 인사이트를 제공합니다. 인큐사이트를 사용하면 비침습적인 방식으로 세포 프로세스를 캡처하고 분석하여 신약 개발 및 메커니즘 연구에 유용한 정보를 제공할 수 있습니다. Scantox에서는 다음과 같은 신경약리학적 응용을 위한 분석법이 확립되어 있습니다:
- 시간 해결 뉴라이트 성장
- 칼슘 영상을 통한 자발적인 신경 세포 활동 또는
- 식균 작용
비디오: 사토리우스 인큐사이트 플랫폼으로 4일 동안 iPSC 유래 뉴런의 뉴라이트 발생을 실시간으로 모니터링합니다.
세포 기반 및 생세포 분석에도 불구하고 체외 치료 연구에서 파생된 샘플도 단백질 또는 mRNA 발현 수준을 분석하여 표적 조절을 조사할 수 있습니다.
웨스턴 블롯팅 프로세스를 간소화하고 개선하기 위해 높은 처리량의 단백질 분석, 정밀한 정량화, 재현 가능한 결과를 제공하는 Simple Western WES 플랫폼을 사용하여 시간을 절약하고 단백질 분석 워크플로우의 변동성을 줄입니다.
또한 고급 면역분석을 위해 메소스케일 디스커버리(MSD) MESO 퀵플렉스 플랫폼을 사용한 분석도 제공합니다. 이 매우 민감하고 신뢰할 수 있는 시스템은 멀티플렉스 단백질 검출 및 정량화를 가능하게 하여 단백질 바이오마커에 대한 포괄적인 통찰력을 제공합니다.
확립된 분석에는 다음이 포함되지만 이에 국한되지는 않습니다:
- MTT
- LDH
- 인큐사이트 생/사 염색
- ATP 분석
- 괴사(요오드화 프로피듐)
- 세포 사멸(YOPRO, 카스파제-3 활성, 아넥신 V)
- TMRM
- 미토트래커
- JC1
- 셀록스
- DCFDA
- MitoSOX
- Aβ1-38, Aβ1-40, Aβ1-42, sAPP-α, sAPP-β
- 타우 및 인산화 타우 프로필
- 신호 전달 분자
- 염증 마커, 사이토카인 분비
- 신경세포 마커(β-III 튜불린, 신경섬유, MAP2, 티로신 하이드 록실라제)
- 아교세포 마커(GFAP, CD11b)
- 질병 관련 마커(타우, 인산화 타우, 신호 분자, 시뉴클레인)
- 시냅스 단백질(시냅토피신)
그림 1: iPSC 유래 글루타메이트 신경세포: 글루탐산 신경세포로의 성숙 확인. 세포를 DIV11에 고정하고 신경 마커 β-튜불린 III, vGLUT2 및 MAP2에 대해 면역세포화학적으로 염색했습니다. 스케일 바 200 µM.
- 시냅스 단백질(글루타메이트 수용체 1, NMDA 수용체, 시냅토피신, 드레브린) 예: 성숙한 해마 신경세포에서 추출한 단백질
- 타우 및 인산화된 타우 동형체
- Aβ 펩타이드 프로파일, Aβ 응집 분석
- 세포 신호 전달 분자
- TDP43
- 시뉴클레인
그림 2: 24시간 동안 LPS 자극 후 마우스 해마 슬라이스에서 NLRP3의 정량화. A: 자동화된 웨스턴 블롯 시스템(WES)을 이용한 LPS 자극 유기형 뇌 절편의 NLRP3 정량화. B: WES로 측정한 LPS 자극 유기형 뇌 절편의 NLRP3 곡선 아래 면적(AUC) 값. 정렬된 도트 블롯; 평균 ± SEM; 그룹당 n = 3 – 4. 덱사메타손(Dexa)을 기준 화합물로 사용했습니다. 단방향 분산 분석에 이은 Dunnett의 다중 비교 사후 검정으로 LPS 처리 그룹과 비교; ***p<0.001.