RNA 결합 단백질 TDP-43은 루게릭병 및 FTLD와 같은 신경 퇴행성 질환과 밀접한 관련이 있습니다.
여러 연구에 따르면 세포질 TDP-43 응집체는 스트레스 과립 마커와 공동 위치하는 것으로 나타났습니다.
스트레스 과립(SG)은 세포가 스트레스를 받는 동안 일부 RNA의 번역을 억제하는 세포질 내포물입니다.
SG 형성이 TDP-43의 축적에 기여한다는 사실이 밝혀진 이후, SG 형성을 억제하거나 TDP-43을 SG로 모집하는 것이 현재 루게릭병 연구의 초점이 되고 있는 경로입니다.
이러한 연구를 뒷받침하기 위해 저희는 TDP-43을 과발현하는 신경모세포종 세포에서 각각의 시험관 모델을 설정했습니다.
따라서 잘 설명된 SG 유도제인 비소나트륨(SA)으로 세포를 처리하고 단백질 단순 WES 기술(그림 1)을 통해 용해성 및 불용성 단백질 분획에서 TDP-43 응집을 조사하고 면역세포화학(그림 2)을 통해 SG 형성 및 TDP-43 모집을 조사했습니다.
WES 분석 결과, SA 처리 시 수용성에서 불용성 TDP-43 종으로 강하게 전환되는 것으로 나타났습니다(그림 1).
SG 마커 G3BP에 대한 면역세포화학 염색은 각 차량 대조군과 비교하여 SA 처리 세포에서 상당한 SG 형성을 보여주었습니다(그림 2).
앞서 살펴본 바와 같이 시클로헥시마이드는 SG 형성을 억제할 수 있습니다(그림 2 맨 아래 줄). 
그림 1. 나트륨 비소(SA) 처리가 용해성 및 불용성 TDP-43 수준에 미치는 영향.
Cells were harvested after SA or vehicle treatment and a soluble and insoluble protein fraction were separated.
Both fractions were analyzed for TDP-43 on proteinsimple WES.
WES lane view of TDP-43 signal in soluble and insoluble fraction. 
그림 2. 비소나트륨 및 실클로헥사마이드 처리된 SH-TDP-43 세포의 대표 이미지.
Vehicle (VC 0.1% DMSO), 200 µM Sodium Arsenite (SA) and SA lesioned plus 10 µM Cycloheximide (CHX) treated SH-TDP-43 cells stained for the stress granule marker G3BP (orange) and human TDP-43 (green).
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