성장 인자 철수 분석은 세포 사멸과 관련된 신경학적 상태를 연구하는 데 유용한 도구로 부상했습니다. 신경세포 배양은 아형에 따라 생존력과 건강을 유지하기 위해 여러 성장 인자의 대체에 의존합니다.
B27은 신경세포의 생존과 기능을 지원하는 필수 성장 인자와 영양소를 함유하고 있어 널리 사용되는 신경세포 배양 보충제입니다. 원시 피질 신경세포의 배양 배지에서 B27을 제거하면 신경 퇴행성 질환, 허혈성 손상, 발달 장애, 신경 노화 및 신경 염증 상태와 같은 특정 신경 질환에서 성장 인자 결핍의 영향을 모방할 수 있습니다.
성장 인자 제거 분석을 통해 신경세포의 생존력, 형태, 기능 및 여러 신경학적 상태와 관련된 신호 경로와 같은 성장 인자 결핍 효과를 검사할 수 있습니다.
B27을 중단하면 마우스 피질 뉴런의 세포 생존력이 감소합니다(그림 1). 이 효과는 뇌유래신경영양인자(BDNF)로 치료하면 되돌릴 수 있습니다.
그림 1: B27을 제거한 후 쥐 피질 뉴런의 대사 활성 분석(MTT). 데이터는 그룹 평균(n=6)으로 표시되며 차량 대조군의 백분율로 표시됩니다. 가장 높은 세 가지 농도(BDNF-2 ~ -4)의 BDNF는 세포의 생존력을 크게 증가시킵니다. 일원 분산 분석에 이어 Dunnet의 사후 검정. ***P<0.001.
성장인자 제거가 세포사멸(그림 2A)과 괴사(그림 2B)에 미치는 영향은 YO-PRO™-1 요오드화 분석법으로 평가할 수 있습니다. 쥐 피질 뉴런을 분석하면 BDNF 처리에 의해 그 효과가 역전될 수 있음을 알 수 있습니다(그림 2).
그림 2: 세포사멸 세포를 검출하기 위한 YO-PRO™-1 요오드화 분석법 (A) 괴사 세포에 대한 PI 염색과 결합한 경우 (B). 데이터는 그룹 평균(n=5)으로 표시되며 차량 대조군의 백분율로 표시됩니다. BDNF는 B27 제거 후 괴사 및 세포사멸 세포의 양을 현저히 감소시킵니다. 비쌍검정 t-검정: *p<0.05 **P<0.01.
또한, 인큐사이트® 생세포 이미징 시스템을 사용하여 B27 철수 유도 세포 사멸을 살아있는 세포에서 모니터링할 수 있습니다.
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