미리 형성된 다양한 재조합 인간 α-시누클레인(α-syn) 피브릴이 시험관 내에서 일차 피질 뉴런에 미치는 독성 및 시딩 특성을 평가했습니다.
연구 결과에 따르면 단량체 인간 α-syn은 세포 생존에 영향을 미치지 않는 반면, 미리 형성된 야생형 및 A53T 인간 α-syn 피브릴은 원시 피질 뉴런에 독성 영향을 미치는 것으로 나타났습니다.
이 독성 효과는 올리고머 이성질체에 의해 초과되었습니다(그림 1A).
테스트된 동형 중 A53T α-syn 피브릴만이 피질 뉴런에서 시딩 특성을 보였습니다(그림 1B). 
그림 1. 마우스 원시 뉴런에서 α-syn 프리폼 피브릴의 시험관 내 평가. 독성
(A) 시딩뿐만 아니라
(B) 마우스 일차 피질 뉴런에 대한 다양한 프리폼 재조합 인간 α-syn 종(Stressmarq)의 특성.
(A) α-syn 종으로 처리한 뉴런과 MTT 분석으로 세포 생존력을 평가한 결과.
(B) α-syn 종으로 처리하고 쥐 α-syn에 대해 면역세포화학적으로 분석한 뉴런.
평균+SD.
본페로니 사후 테스트를 사용한 일원 분산 분석(Bonferroni 사후 테스트: VC).
** p<0.01, *** p<0.001. 
그림 2. 다양한 사전 형성된 재조합 인간 α-syn 종으로 시딩 후 내인성 쥐 α-syn 축적의 대표 이미지(Stressmarq).
Neurons were treated with
(A) monomeric and
(B) A53T preformed fibrils and after incubation immunocytochemically stained for murine α-syn.
Nuclear stain DAPI = blue; murine α-syn = red; scale bar 100 µM.
A53T 돌연변이가 있는 α-시누클레인을 발현하는 생체 내 마우스 모델
hA53Ttg 마우스는 쥐 Thy-1 프로모터의 제어하에 A53T 돌연변이 인간 α-시누클레인을 발현합니다. 이 라인 M53은 C57BL/6J 배경에서 사육되었습니다(Chandra et al.2005).
동물은 다음과 같은 표현형을 보입니다:
- 야생형 생쥐에 비해 α-시누클레인 수치가 10~20배 높습니다(Chandra et al.,2005).
- 6개월 시점의 RotaRod 테스트에서 운동 결손(Chandra 외, 2005; Rothman 외, 2013)
- 8주 후 와이어 매달리기 테스트에서 근력 약화(Maki et al., 2019)
- 각각 10주 및 14주부터 시작된 오픈 필드 및 엘리베이트 플러스 미로 테스트에서 불안감 감소(Rothman et al., 2013)
- 평균 생존 기간 약 43주(Chandra et al., 2005)
위에서 설명한 표현형은 PD 병리를 밀접하게 반영하기 때문에 hA53T-Sud 마우스는 약물 테스트에 완벽한 모델입니다. 원시 피질 뉴런 또는 hA53Ttg 마우스에 대한 연구를 시작하려면 지금 바로 문의하세요!
