_CCl4 유도 간 섬유증 마우스 모델

_CCl4 마우스 모델을 구축하면 새로운 항섬유화 약물의 전임상 시험을 진행할 수 있습니다. 간 섬유화는 대부분의 만성 간 질환에서 발생합니다.
인간의 경우, 연구자들은 이미 간 섬유화가 가역적이라는 사실을 입증하여 항섬유화 약물 개발을 촉진할 수 있었습니다.
이러한 신약의 효능을 테스트하려면 적절한 전임상 모델이 필요합니다.
사염화탄소(_CCl4)는 유기 염화물로 가장 강력한 간 독소 중 하나로 알려져 있습니다.
따라서 전임상 연구에서 생쥐의 간 섬유화를 유도하는 데 사용됩니다.
따라서 우리는 이 치명적인 질환에 대한 신약을 생쥐에서 테스트할 수 있도록 _CCl4 유도 간 섬유화 모델을 확립했습니다.
생후 7주령의 C57Bl/6JRccHsd 마우스를 대상으로 총 9주 동안 매주 3회씩 _CCl4 또는 차량을 경구 투여했습니다.
치료 기간이 끝났을 때 체중을 측정한 결과, _CCl4를 처리한 동물과 차량 처리한 동물 간에 유의미한 차이가 없었습니다(그림 1A).
희생 후 간 무게를 측정하고 간 대 체중 비율을 계산한 결과, CCl4 _처리 동물은 대조군에 비해 간 무게가 유의하게 증가한 것으로 나타났습니다(그림 1B).
전형적인 간 섬유화 마커의 mRNA 수준을 정량화한 결과, CCl4 _처리 마우스에서 Col1a1과 Acta2가 크게 증가한 것으로 나타났습니다(그림 2A, B).
히드록시프롤린 분석법을 사용하여 히드록시프롤린 단백질 수준을 평가하고 면역 형광 표지법을 통해 Col1a1 및 평활근 액틴(SMA)을 평가한 결과, 대조군에 비해 _CCl4 처리 동물의 간에서 이러한 마커가 크게 증가한 것으로 나타났습니다(그림 2C-E). 그림 1: _CCl4 및 차량 처리된 C57Bl/6JRccHsd 마우스의 체중 및 간 대 체중 비율. A: 체중.
B: 간 대 체중 비율.
비쌍검정 t-검정.
그룹당 n = 6; 평균 + SEM. ***P<0.001; NS: 유의하지 않음. 그림 2: _CCl4 치료 후 전형적인 간 질환 마커의 발현 수준. Col1a1의 mRNA 발현 수준
(A) 및 Acta2
(B).
수치는 2^(-ΔΔCT) 방법을 사용하여 HKG HPRT 및 차량 그룹과 비교하여 x배 변화로 표시했습니다.
C: 히드록시프롤린 단백질 수준(ng/µl).
Col1a1의 정량화
(D) 및 SMA
(E) 면역 반응(IR) 면적(백분율).
A-E: 모든 마커는 9주간의 _CCl4 또는 차량 처리 후 간에서 측정되었습니다.
비쌍검정 t-검정; 그룹당 n = 5/6; 평균 + SEM; *p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001.