신경 퇴행성 질환에 대한 미세아교세포의 중요성은 잘 알려져 있으며, 따라서 이 세포는 새로운 약리학적 개입의 표적으로 자주 사용됩니다.
이 세포 유형을 연구하기 위해 생후 초기의 미세아교세포를 생쥐에서 분리하는 것은 훌륭한 도구이지만, 노화 또는 질병에 걸린 개체의 상태를 제대로 반영하지 못합니다.
따라서 특정 질병 모델의 성체 마우스 뇌에서 자기 세포 분류(MACS)를 통해 생존 가능한 미세아교세포를 분리하면 시험관 내에서 미세아교세포 표적 치료의 효능을 평가할 수 있는 새로운 가능성이 열립니다.
여기에서는 9개월 된 5xFAD 마우스에서 분리한 성체 미세아교세포의 식세포 반응을 연령과 일치하는 비형질전환(ntg) 미세아교세포와 비교하여 조사했습니다.
미세아교세포에 pH에 민감한 pHrodo™ Red 라벨과 결합된 Aβ1-42를 추가하면 흡수 및 리소좀 분해를 모니터링할 수 있으며, 이는 인큐사이트® 라이브셀 이미징 시스템에서 붉은 형광 증가로 측정할 수 있습니다.
Aβ1-42로 표지된 pHrodo™ Red를 첨가한 후 8시간이 지나자 5xFAD 미세아교세포는 연령과 일치하는 ntg 미세아교세포에 비해 2배 이상의 형광 강도를 보였으며, 이는 5xFAD 미세아교세포에서 Aβ의 강력한 식세포화를 반영합니다(그림 1A).
ntg 미세아교세포도 Aβ1-42의 식세포화를 보였지만, 5xFAD 미세아교세포의 이 매우 강한 식세포 반응은 시간이 지나도 지속되었고 마지막에는 세포 상청액에 남아있는 Aβ1-42를 측정하여 확인되었습니다.
5xFAD 미세아교세포는 상청액에서 현저히 감소한 Aβ1-42를 관찰할 수 있는 ntg 미세아교세포에 비해 훨씬 더 많은 Aβ1-42를 흡수했습니다(그림 1B). 그림 1: 분리된 5xFAD 및 ntg 동물의 성인 미세아교세포에서 Aβ1-42 식세포증 평가. Aβ1-42 식세포 작용을 48시간 동안 pHrodo™ Red 표지 Aβ1-42 및 IncuCyte® 라이브셀 이미징을 사용하여 측정했습니다.
(A).
48시간 배양 후, 동일한 세포의 상청액을 분석하여 잔류 Aβ1-42를 분석했습니다.
(B).
그룹당 n=5.
평균 ± SEM.
두 꼬리 비쌍검정 t-검정; ***p<0.001. MACS 분리 미세아교세포 연구를 시작하려면 지금 바로 문의하세요!