타우 흡수 및 시딩

알츠하이머병 치료의 초점은 타우의 흡수를 억제하거나 예방할 수 있는 새로운 화합물의 개발로 옮겨가고 있습니다. 따라서 인간 질병의 타우 병리를 반영하는 신뢰할 수 있는 시험관 내 모델이 필요합니다. 우리는 안정적으로 형질전환된 타우 과발현 SH-SY5Y 세포주와 마우스 일차 피질 뉴런을 인간 AD 시드와 함께 사용하여 타우 섭취 분석법을 확립하고 최적화했습니다.

그림: P301L 돌연변이(A, B)와 마우스 일차 피질 뉴런(C, D)으로 2N4R 타우를 과발현하여 안정적으로 감염된 SH-SY5Y 세포에서의 타우 흡수(A, C) 및 시딩(B, D). 세포를 AD 뇌에서 추출한 타우 씨앗(AD 씨앗) 또는 동일한 씨앗과 함께 48시간 동안 배양하고, 시딩 및 흡수를 줄이기 위해 항타우 항체(HT7)를 기준 항목으로 함께 배양했습니다. 타우 시딩은 리포펙타민이 있는 상태에서 2.5 µg의 씨앗(총 단백질)을 세포에 적용하여 평가하고, 타우 흡수는 리포펙타민이 없는 상태에서 20 µg의 씨앗(총 단백질)을 적용하여 모니터링했습니다. 타우 응집은 씨드를 도포한 후 48시간 후에 Cisbio의 HTRF 기반 타우 응집 키트를 사용하여 평가했습니다. 차량 처리된 세포를 대조군으로 사용했습니다. Dunnett의 다중 비교 테스트와 차량 대조군(VC)을 사용한 일원 분산 분석(One-Way ANOVA). 평균 + SEM; n = 6. ***p<0.001.