축삭 기능의 병리학적인 변화는 많은 신경 장애의 잘 알려진 특징입니다. 오늘날 손상 후 축삭의 회복을 자극하는 것은 새로운 치료제 개발에 중요한 측면입니다. 미세유체챔버(MFC)를 사용하면 소체와 독립적으로 축삭 구획에 대한 독특한 통찰력을 제공할 수 있습니다. 따라서 우리는 성인 야생형 마우스의 해리된 DRG 뉴런을 사용하여 MFC에서 축삭 손상 및 재성장 모델을 확립했습니다. MFC의 체세포 쪽에 뉴런을 이식한 지 3일이 지나면 이미 축삭돌기가 미세 홈을 통과하기 시작합니다. 배양 5일 후, 축삭은 홈을 완전히 가로질러 축삭 쪽에 아름다운 네트워크를 구축했습니다(그림 1 A). 그런 다음 축삭 구획에서 배지를 빠르게 제거하여 뉴런을 절제할 수 있습니다(그림 1 B). 발달 화합물은 체세포와 축삭실 사이의 정수압 차이를 이용하여 축삭 또는 체세포 쪽에만 선택적으로 적용될 수 있습니다. 차량 처리된 세포와 비교하여 축삭 측에 NGF를 적용한 효과를 정량적으로 분석한 결과, 분지 및 축삭 길이가 유의하게 증가한 반면 교차 축삭의 수에는 영향을 미치지 않는 것으로 나타났습니다(그림 2). 
그림 1. 미세유체 챔버에 있는 야생형 성체 마우스의 DRG 뉴런 대표 이미지. DRG 뉴런을 DIV5까지 배양하고 고정하기 전과 후를 비교했습니다.
(A) 및 후
(B) 기계적 절제술.
뉴런과 그 확장을 시각화하기 위한 튜불린 III(TubIII) 라벨링과 핵을 염색하기 위한 DAPI.
축삭 절제술 전 축삭 측의 교차 축삭
(A) 및 축삭 절제술에 의한 축삭의 제거
(B).
스케일 바 1,000 µm. 
그림 2. 축삭 절제술 후 24시간 후 축삭 재성장에 대한 NGF 치료의 효과. 교차하는 축삭의 총 수를 이미지 기반 정량화를 사용하여 다음 마커를 평가했습니다.
(A), 교차 축삭당 가지점 수
(B) 및 모든 축삭의 총 길이
(C); n = 그룹당 웰 4개.
짝을 이루지 않은 t-검정; *p<0.05; **p<0.01.
VC: 차량 제어; NGF: 신경 성장 인자. 지금 바로 문의하여 DRG 뉴런에 대한 연구를 시작하세요!
