様々な組換えヒトα-シヌクレイン（α-syn）フィブリルの毒性および大脳皮質初代ニューロンへの播種特性をin vitroで評価した。
その結果、単量体ヒトα-synは細胞生存率に影響を及ぼさないが、予め形成された野生型およびA53Tヒトα-syn線維は初代皮質ニューロンに対して毒性作用を有することが示された。
この毒性作用は、オリゴマーアイソフォームによって上回った（図1A）。
試験したアイソタイプのうち、A53T α-syn線維のみが大脳皮質ニューロンへの播種性を示した（図1B）。
図1.マウス初代神経細胞におけるα-synプレフォームドフィブリルのin vitro評価。毒性
(A)と播種
(B)マウス初代大脳皮質ニューロンに対する様々な組換えヒトα-syn種（Stressmarq）の特性。
(A）α-syn種で処理し、MTTアッセイで細胞生存率を評価した神経細胞。
(B）α-syn種で処理し、マウスα-synについて免疫細胞化学的に分析したニューロン。
平均値＋SD。
Bonferroni post hoc testを伴う一元配置分散分析（対ビヒクルコントロール：VC）。
** p<0.01、*** p<0.001。 
図2. 異なる組換えヒトα-syn種（Stressmarq）を播種した後の内因性マウスα-syn蓄積の代表的画像.
Neurons were treated with
(A) monomeric and
(B) A53T preformed fibrils and after incubation immunocytochemically stained for murine α-syn.
Nuclear stain DAPI = blue; murine α-syn = red; scale bar 100 µM.
A53T変異を有するα-シヌクレイン発現マウスin vivoモデル
hA53TtgマウスはマウスThy-1プロモーターの制御下でA53T変異ヒトαシヌクレインを発現する。 この系統M53はC57BL/6Jバックグラウンドで育種された（Chandra et al.2005）。
動物は以下の表現型を示す：
- 野生型マウスと比較してα-シヌクレインレベルが10～20倍高い (Chandra et al.,2005)
- 6ヵ月後のRotaRodテストにおける運動障害（Chandra et al.）
- ワイヤーハンギングテストにおける筋力低下（～8週）（Maki et al.
- オープンフィールドおよび高架式十字迷路試験において、それぞれ10週目および14週目から不安が軽減した（Rothman et al.）
- 平均生存期間は約43週間（Chandra et al.）
上記の表現型はPD病態を忠実に反映しており、hA53T-Sudマウスは薬剤試験に最適なモデルです。一次皮質ニューロンまたはhA53Ttgマウスを用いた試験をご希望の方は、今すぐ弊社までご連絡ください！
