_CCl4誘発肝線維症モデルマウス

_CCl4マウスモデルの確立により、新しい抗線維化薬の前臨床試験が可能になる。 肝線維化はほとんどの慢性肝疾患で起こる。
ヒトでは、研究者はすでに肝線維化が可逆的であることを示すことができ、抗線維化薬の開発を促進している。
これらの新薬の有効性を検証するためには、適切な前臨床モデルが必要である。
四塩化炭素（_CCl4）は有機塩素化合物で、最も強力な肝毒素の一つとして知られている。
そのため、マウスに肝線維症を誘発する前臨床研究に用いられている。
そこで我々は、この壊滅的な疾患に対する新薬をマウスで試験できるように、_CCl4誘発肝線維症モデルを確立した。
7週齢のC57Bl/6JRccHsdマウスにCCl₄またはビヒクルを週3回、計9週間i.p.投与した。
投与期間終了時に体重を測定したところ、_CCl4投与群とビヒクル投与群の間に有意差は認められなかった（図1A）。
犠牲後、肝臓重量を測定し、体重に対する肝臓重量比を算出したところ、_CCl4投与動物は対照動物に比べて肝臓重量が有意に増加していた（図1B）。
典型的な肝線維化マーカーのmRNAレベルを定量したところ、CCl₄投与マウスではCol1a1とActa2が非常に増加していた（図2A, B）。
ヒドロキシプロリンアッセイを用いたヒドロキシプロリンタンパク質レベルの評価、および免疫蛍光標識によるCol1a1と平滑筋アクチン（SMA）の評価では、CCl₄投与マウスの肝臓では対照と比較してこれらのマーカーが強く増加していた（図2C-E）。図1：_CCl4投与およびビヒクル投与したC57Bl/6JRccHsdマウスの体重および肝臓の対体重比。A：体重。
B：肝臓／体重比。
非対t検定。
n=6/群；平均+SEM。 ***p<0.001; n.s.：有意ではない。図2：_CCl4処理後の典型的な肝疾患マーカーの発現レベル。
(A)とActa2
(B).
レベルは、HKG HPRTおよびビヒクル群に対する2^(-ΔΔCT)法を用いたx-倍変化として示した。
C：ヒドロキシプロリンタンパク質レベル（ng/μl）。
Col1a1
(D)とSMA
(E）免疫反応性（IR）面積（％）。
A-E：すべてのマーカーは9週間の_CCl4またはビヒクル投与後の肝臓で測定した。
n = 5/6/群; 平均 + SEM; *p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001。